冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）熒光染色試劑盒

產(chǎn)品說(shuō)明書（中文版）

主要用途

  冰凍切片淀粉樣蛋白（AMYLOID）硫磺素T（thioflavine T）熒光染色試劑是一種旨在使用硫磺素T染色技術(shù)，與淀粉樣蛋白結(jié)合，來(lái)分析冰凍組織切片中蘋果綠熒光現(xiàn)象的*而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。主要適用于冰凍組織切片的淀粉樣蛋白檢測(cè)。廣泛用于淀粉樣蛋白樣疾病的病理生理的研究。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，操作簡(jiǎn)捷，性能穩(wěn)定，熒光清晰。

技術(shù)背景

淀粉樣蛋白（AMYLOID）是一種同質(zhì)性、嗜伊紅性（eosinophilic）、不溶性的纖維蛋白（fibrous protein）聚合體，具有共同的β交叉折疊層（β sheet）組織結(jié)構(gòu)特征，沉積在細(xì)胞外。蛋白質(zhì)錯(cuò)誤折疊（misfolding），且異常自我聚集將導(dǎo)致淀粉樣變性（amyloidosis），細(xì)胞毒纖維沉積，產(chǎn)生組織損傷，進(jìn)而引起23種不同淀粉樣蛋白綜合癥，超過(guò)400種疾病，包括阿茨漢姆癥、巴金森氏癥、II型糖尿病、白內(nèi)障、朊病毒疾病等。淀粉樣蛋白斑（amyloid plaque）和神經(jīng)纖維纏結(jié)（neurofibrillary tangles；NFT）是淀粉樣蛋白綜合征的病理性特征。硫磺素T（thioflavine T），陽(yáng)離子苯并噻唑（benzothiazole）衍生物，在鹽酸的參與下，通過(guò)脫氫硫甲苯胺（dehydrothiotoluidine）的甲基化而成，是*的淀粉樣蛋白熒光探針，體內(nèi)或體外識(shí)別顯示和定量分析纖維化動(dòng)力學(xué)。較之硫磺素S（thioflavine S），硫磺素T更為穩(wěn)定和廣譜，體內(nèi)檢測(cè)更佳，尤其適合在液體狀態(tài)下檢測(cè)。一旦與淀粉樣蛋白纖維（寡聚體）結(jié)合，其熒光強(qiáng)度（激發(fā)波長(zhǎng)440nm，散發(fā)波長(zhǎng)490nm），顯著增強(qiáng)，呈現(xiàn)蘋果綠熒光。

產(chǎn)品內(nèi)容

  清理液（Reagent A）          毫升

  固著液（Reagent B）            毫升

  染色液（Reagent C）            毫升

  強(qiáng)化液（Reagent D）            毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書             1份

保存方式

保存   染色液（Reagent C）在-20℃冰箱里，其余的保存在4℃冰箱里；   染色液（Reagent C），避免光照；   固著液（Reagent B）具有揮發(fā)性，注意密閉；試劑具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證3月

用戶自備

（共聚焦）熒光顯微鏡：用于組織細(xì)胞染色后觀察分析

實(shí)驗(yàn)步驟

1． 取出10片待測(cè)的冰凍組織切片

2． 小心加上xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面

3． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

4． 小心加上xx微升   固著液（Reagent B）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面

5． 在4冰箱里孵育10分鐘

6． 小心移去切片上的   固著液（Reagent B）

7． 小心加上xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面

8． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

1． 小心加上xx微升   染色液（Reagent C），鋪滿整個(gè)切片樣品表面

2． 室溫下孵育10分鐘，避免光照

3． 小心移去切片上的   染色液（Reagent C）

4． 小心加上xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面

5． 室溫下孵育1分鐘

6． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

7． 小心加上xx微升   強(qiáng)化液（Reagent D），鋪滿整個(gè)切片樣品表面

8． 室溫下孵育10分鐘

9． 小心移去切片上的   強(qiáng)化液（Reagent D）

10． 小心加上xx微升   清理液（Reagent A）在切片上，鋪滿整個(gè)切片樣品表面

11． 室溫下孵育3分鐘

12． 小心移去切片上的   清理液（Reagent A）

13． 封片

14． 即刻在（共聚焦）熒光顯微鏡下（激發(fā)波長(zhǎng)440nm，散發(fā)波長(zhǎng)490nm）觀察：

淀粉樣蛋白：呈現(xiàn)蘋果綠熒光

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品為50次操作

2． 操作時(shí)，須帶手套

3． 試劑具有腐蝕性，注意操作安全

4． 試劑溶液在樣品表面時(shí)，避免有氣泡存在，同時(shí)確保鋪滿樣品表面

5． 組織細(xì)胞染色完成后，即刻進(jìn)行熒光顯微鏡觀察

6． 槲皮素（Quercetin）、姜黃色素（curcumin）、 藜蘆醇（resveratrol）等會(huì)干擾檢測(cè)

7． 本公司提供系列淀粉樣蛋白染色試劑產(chǎn)品

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定熒光清晰