全組織細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒是一類熒光成像工具,用來標(biāo)記亞細(xì)胞,細(xì)胞器;例如細(xì)胞膜、溶酶體、線粒體和細(xì)胞核等。
全組織細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒提供的細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞器熒光標(biāo)記方案,每種檢測(cè)方案均能提供藍(lán)色/綠色/紅色/橙色等不同熒光檢測(cè)方法。這種的細(xì)胞標(biāo)簽為從空間上和時(shí)間上研究發(fā)生的細(xì)胞活動(dòng)提供了一種十分有效的方法。
全組織細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒是設(shè)計(jì)用來標(biāo)記活細(xì)胞的線粒體的,使之帶紅色熒光。本試劑盒使用一種專屬染料,選擇性地在不同膜電位的線粒體中積累。這種線粒體指示劑是一種疏水性復(fù)合物,可以輕易地滲透進(jìn)入活細(xì)胞中,且當(dāng)進(jìn)入細(xì)胞后就被鎖定在線粒體中。這種熒光性線粒體指示劑可以在線粒體中保留很長(zhǎng)時(shí)間,因?yàn)樵撝甘緞в心芏ㄎ挥诩?xì)胞的基團(tuán)。
其關(guān)鍵特征是其染色效率顯著性提高。本標(biāo)記方法十分穩(wěn)定,需要親手操作的地方很少。它可以用于許多熒光研究中,例如微孔板分析,免疫組化和流式細(xì)胞術(shù)。全組織細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒也可以用于多種不同類型的研究中,包括細(xì)胞粘附性、趨化性、多藥物抗性、細(xì)胞活性、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞毒性的研究。本試劑盒提供所有的必需組分和佳細(xì)胞標(biāo)記方法。它適用于增殖型和非增殖型細(xì)胞,也可以用于懸浮和貼壁細(xì)胞。
疫印跡重要也是后一步就是酶與底物反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè),本試劑盒以化學(xué)熒光發(fā)光方法檢測(cè)蛋白質(zhì)或核酸類生物大分子。其原理是,蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,以一抗及辣根過氧化物酶HRP標(biāo)記的二抗結(jié)合膜上的目的蛋白,或以HRP標(biāo)記的探針直接或間接結(jié)合膜上的核酸。
洗膜后用本產(chǎn)品配制的ECL工作液,在可見光下室溫孵育膜數(shù)分鐘,將印跡膜用保鮮膜包被粘貼固定于X光片曝光暗盒。然后轉(zhuǎn)入暗室將X光膠片壓在膜上曝光數(shù)秒到數(shù)分鐘至數(shù)小時(shí)。顯影定影后蛋白質(zhì)或核酸條帶可清晰顯示在X光膠片上。也可不進(jìn)行X光膠片曝光直接對(duì)印跡膜進(jìn)行熒光CCD掃描。
全組織細(xì)胞色素C氧化酶活性染色試劑盒注意事項(xiàng):
1、染色后請(qǐng)盡快檢測(cè)。
2、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
3、染色時(shí)間根據(jù)不同樣本的實(shí)際染色結(jié)果做相應(yīng)調(diào)整。
4、PI有毒,操作時(shí)要戴上手套。
5、流式檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí),其DNA可染性降低被認(rèn)為是凋亡細(xì)胞的標(biāo)志之一,但這種DNA可染性降低也可能是因?yàn)镈NA含量的降低,或者是因?yàn)镈NA結(jié)構(gòu)的改變使其與染料結(jié)合的能力發(fā)生改變所致。